天元航材化工原料厂家的小编今天给大家介绍下关于电镜超薄切片柠檬酸铅染色保存方法的相关介绍,超薄切片用于电子显微镜观察。由于电子穿透组织的能力较低,用于电镜的切片要求极薄(一般为40~50nm厚),称为超薄切片。随着电子显微镜在生物医学研究中的广泛应用,对观察样品制备条件的要求也越来越严格。由于Watson(1958)首先提出铅化合物可以增加超薄切片细胞超微结构的对比度,因此Reynolds(1963)介绍的柠檬酸铅在国内外多被用作常规的铅染料。然而,多年来,超薄切片的铅污染一直是许多实验室的普遍问题。电子显微镜的超薄切片通常用醋酸铀和柠檬酸铅染色。由于液态铅与空气中的二氧化碳接触,染色常会产生细小的碳酸铅(黑色)沉淀,直接影响超微结构的观察,导致染色失败。而且铅溶液不能长期存放,否则污染会更严重。
柠檬酸铅:密度高,对多种组织结构有广泛的亲和作用,特别是对改善细胞质系统软件和长链脂肪酸化学品之间的差距,糖原不能用锇酸染色效果染色。由于铀和铅具有不同的染色特性,目前切片切割广泛采用双向染色。即先用二氧化铀冰醋酸染料,再用柠檬酸铅染色剂相互填充,得到染色剂的最佳实际效果。
那么我们该如何对电镜超薄切片染色液柠檬酸铅保存的改进以下呢
柠檬酸铅的污染是电子显微镜下超薄切片染色中最令人不安的事情。由于柠檬酸铅染料碱度高(pH值在12.0左右),在空气中很容易与二氧化碳一起沉淀出碳酸铅。由于沉淀,铅颗粒出现在标本上,铅颗粒覆盖了标本的组织结构。它也与细胞颗粒成分混淆。因此,为获得满意的染色效果,柠檬酸铅染料在储存和使用过程中应尽量减少与空气的接触。柠檬酸铅染料现在通常储存在溶液瓶中,在染色过程中用移液管吸出。
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